細胞質量決定實驗的進程與結果，相信很多小伙伴在細胞培養(yǎng)上走了不少彎路，事實上因為細胞污染而耽誤了實驗進度，影響畢業(yè)和發(fā)文章的進程的事件時常發(fā)生。

　　所以今天小編整理了一下細胞培養(yǎng)過程中出現(xiàn)的一些現(xiàn)象與處理方法，希望可以幫到大家。

　　一、細菌污染

　　細菌污染最為常見，一旦操作稍有不當，就會引起細胞污染，細菌污染后顯微鏡下觀察呈現(xiàn)有黑色細條沙狀，當然，根據(jù)感染的細菌不同，所呈現(xiàn)的狀態(tài)也不盡相同，有球形、桿狀等，其次，培養(yǎng)液發(fā)黃，變渾濁，可明顯看見培養(yǎng)皿中有細沙狀的沉淀物，時不時還有異樣氣味發(fā)出，如下圖所示：

　　處理方法：
　　在培養(yǎng)基中加入抗生素處理，可以用四環(huán)素，慶大霉素，或者鏈霉素，前兩者的工作濃度是50 μg/mL;鏈霉素的工作濃度是100 μg/mL。但是，細胞本身也有影響，狀態(tài)大不如從前，所以，防范于未然，正確操作、嚴格執(zhí)行無菌操作規(guī)范，定期清理消毒培養(yǎng)設施才是關鍵!
 

　　二、真菌污染

　　真菌污染培養(yǎng)液清亮透明，不會像細菌感染大爆發(fā)，所以很難早期發(fā)現(xiàn)，鏡下有時候象絲狀，有時候象珊瑚狀，慢慢地會長出很細的黑色絲狀物，這個時候，已經(jīng)晚了，細胞很難救活了。

　　處理方法：趕緊扔掉，不要再想挽救，即使再珍貴。然后消毒滅菌培養(yǎng)間，CO2孵箱，器皿和培養(yǎng)液。
 

　　三、霉菌污染

　　同真菌感染一致，因為培養(yǎng)液是清亮的，所以霉菌污染早期難以發(fā)現(xiàn)，等發(fā)現(xiàn)時往往已經(jīng)為時過晚了。培養(yǎng)液中慢慢地出現(xiàn)絮狀雜質，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物，如同風中柳絮，一般不仔細看發(fā)覺不出來。細胞仍可生長，但時間一長，細胞的狀態(tài)就變差，不再增長。見下圖。

　　處理方法：建議果斷舍棄該污染細胞，將環(huán)境消毒，因為霉菌的頑固可能會導致下幾批細胞都會污染，所以，采用酒精底地擦洗一遍CO2孵箱。然后再用新潔爾滅擦洗一遍，把水盤里加上飽和量的硫酸銅。千萬不可大意!
 

　　四、支原體感染

　　培養(yǎng)液變渾濁，支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯，只是細胞狀態(tài)變差、生長變慢，在顯微鏡下觀察可能會有小黑點，但培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁。細胞傳代以后就出現(xiàn)細胞間黑點，細胞空泡化，很多類似凋亡、壞死的細胞，最終細胞漂浮，死亡。

　　處理方法：
　　如果不是很珍貴的細胞的話，建議直接扔了吧。還是那句話，預防為主，如果是珍貴的細胞的話，建議使用——支原體清除培養(yǎng)基。

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　　此款支原體清除培養(yǎng)基是在市面上已有的支原體清除培養(yǎng)基基礎上開發(fā)的新一代產(chǎn)品，含有清除支原體的特殊成分(一種混合制劑，可通過抑制DNA和支原體生長所必須的相關蛋白合成來取得良好的支原體清除效果，挽救珍貴的細胞，減少因支原體污染帶來的損失)。

　　此產(chǎn)品經(jīng)過了數(shù)十種細胞的測試和長期的實驗驗證，對細胞無害，對清除支原體污染效果好，能夠很好的抑制和殺滅支原體。并且安全可靠，工作濃度低，無細胞毒性。

　　使用支原體清除培養(yǎng)基處理污染細胞前后對比圖：

　　五、黑膠蟲污染

　　開始污染時對細胞無影響，當數(shù)量達到一定程度時就會對細胞產(chǎn)生影響。400倍顯微鏡下可見點狀或片狀游動小體，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。

　　處理方法：可以增加細胞的種板密度，以提高細胞的生存率，盡早處理細胞，越快越好。如果實在來不及了，推薦使用——黑膠蟲清除培養(yǎng)基

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　　使用黑膠蟲清除培養(yǎng)基理污染細胞前后對比圖：

　　溫馨提醒：

　　學會對各種污染情況的辨別和處理是一項的實驗技能，希望大家在看完我們的文章后結合你的實驗操作，學會如何應對細胞污染。

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