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/HCV-C中國倉鼠卵巢癌細胞ATCC

簡要描述:/HCV-C中國倉鼠卵巢癌細胞ATCC,雅吉生物細胞ATCC引種,代次靠前,細胞活率高狀態(tài)好,售后完善,更多細胞系,原代細胞和培養(yǎng)試劑歡迎新老客戶咨詢訂購

  • 產(chǎn)品型號:YS728C
  • 廠商性質:生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2025-04-09
  • 訪  問  量:190

詳細介紹

細胞名稱:/HCV-C中國倉鼠卵巢癌細胞ATCC

細胞代次:P4

細胞規(guī)格:T25瓶(包郵)/2冷凍管(需加干冰運輸費)

細胞凍存:無血清凍存液

細胞傳代:第一次建議1:2

細胞收到后處理

培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿培養(yǎng)液并封好瓶口是運輸細胞的最好辦法。收到細胞用75%酒精噴灑整個細胞瓶,消毒后放到超凈臺內(nèi)嚴格無菌操作,將細胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存(最好40x,100x,200x各一張),前三天照片是重要售后依據(jù),不提供照片默認收到狀態(tài)良好。(注意密封培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱時要將蓋子擰松,傳代后建議一瓶用原瓶的培養(yǎng)基,另外一瓶用自己配的培養(yǎng)基,以便進行對比培養(yǎng))

培養(yǎng)前的工作準備充分


包括耗材的處理、試劑的配置,無菌檢驗等等。

玻璃器皿的清洗。對于玻璃器皿(細胞瓶、裝營養(yǎng)液的瓶子、小青m素瓶等)要先用洗衣粉刷干凈(注意死角),然后沖干凈。用酸液浸泡 24 h 以上,之后用清水沖洗 10 遍,除去殘留酸液。瓶子之類,沖洗過程要使勁搖晃。然后在雙蒸水浸泡 24 h。晾干后包扎,160℃ 干烤 2 h 待用。

試劑配置。細胞培養(yǎng)用的液體一般使用雙蒸以上的水即可。并注意 pH 值的調節(jié)。

無菌檢驗。主要采用過濾除菌:如抗生素、G-418 溶液、各類培養(yǎng)基、丙酮酸鈉等。有些可以采用高壓滅菌,如 PBS、D-Hank's等。


試劑分裝保存

包括營養(yǎng)液、血清等。


血清特別重要。血清必須貯存于 –20℃,如果一次無法用完一瓶,可將 40~50ml 分裝于無菌酸處理瓶中,甚至置青m素瓶保存。一般廠商提供的血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。(一般情況下不影響細胞培養(yǎng))

瓶裝血清一定要逐步解凍: 4℃ 冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由 –20℃ 直接至 37℃ 解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。

熱滅活是指 56℃,30 分鐘加熱已解凍之血清。水浴鍋升到 56℃后,將血清放入,待溫度升高到 56℃ 后計時,一般 5 分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。

ATCC.png

注意事項:有些細胞比較特殊,如貼壁不牢,在運輸過程中發(fā)生容易細胞脫落,這是正?,F(xiàn)象。請將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm離心5min,收集上清作過渡培養(yǎng)(后期對比培養(yǎng)),沉淀加入消化液1-2ml,輕輕吹打,重懸,消化1-2分鐘后,加5ml培養(yǎng)基終止反應。再離心,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進行分瓶傳代(兩個T25),補充新的培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

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